到底为什么选CCK8不选MTT,这问题终于有答案了!
选择CCK8而不是MTT进行细胞增殖或毒性检测,主要基于几个关键因素的考量。首先,CCK8法在检测原理上对细胞状态的干扰较小。MTT法需要使用二甲基亚砜(DMSO)来溶解细胞内形成的甲臜结晶,而DMSO本身具有一定的细胞毒性,可能会对实验结果产生干扰。相比之下,CCK8法使用的是水溶液形式的WST-8,无需使用有机溶剂,因此对细胞的毒性更小,能够更真实地反映细胞活性。
其次,CCK8法的检测灵敏度更高。由于CCK8法使用的是水溶性染料,它在细胞内的扩散更为均匀,产生的信号更强,检测的线性范围更宽。这使得CCK8法在低细胞密度下也能获得可靠的检测结果,而MTT法在低细胞密度时信号较弱,容易受到背景噪声的干扰。
此外,CCK8法的操作简便性也更高。CCK8法只需要在检测时加入CCK8试剂,无需额外的溶解步骤,从而减少了操作步骤和潜在的误差。MTT法则需要额外的DMSO溶解步骤,这不仅增加了操作的复杂性,还可能引入更多的误差。
最后,CCK8法在重复性和稳定性方面表现更优。由于CCK8法对细胞状态的干扰较小,且操作简便,因此更容易获得重复性和稳定性较高的实验结果。MTT法由于受到多种因素的影响,如DMSO的浓度、孵育时间等,其重复性和稳定性相对较差。
综上所述,CCK8法在细胞毒性检测中具有明显的优势,包括对细胞毒性小、检测灵敏度高、操作简便以及重复性和稳定性好等。因此,在实验研究中,CCK8法成为了更优选的方法。
