流动相用前为啥要脱气?这可是保证实验结果准确的关键一步!
在色谱实验中,流动相使用前进行脱气是一个至关重要的步骤,这主要是因为流动相中溶解的气体可能会对实验结果产生显著的负面影响。气体分子,尤其是氧气和氮气,在高压下溶解于流动相中,并在进入色谱柱时因压力骤降而释放出来,形成气泡。
这些气泡的存在会带来一系列问题。首先,它们会干扰流动相的均匀流动,导致色谱峰形变宽、峰高降低,甚至出现双峰或拖尾现象,严重影响了分离效果和定量分析的准确性。其次,气泡可能堵塞色谱柱的微细通道,损害柱子的性能,缩短其使用寿命。此外,某些气体如氧气还可能参与氧化反应,与样品或柱子材料发生反应,引入额外的杂质或改变样品的化学性质,从而干扰实验结果。
因此,为了确保色谱实验的准确性和重现性,避免气泡对分离度和检测信号的影响,使用前对流动相进行彻底脱气是必不可少的操作步骤。常用的脱气方法包括使用在线脱气机、通过氩气或氮气吹扫流动相,或使用真空脱气装置等。通过有效脱气,可以去除流动相中的溶解气体,保证实验条件的稳定,从而获得可靠、准确的实验结果。
