lg函数excel（实验笔记丨病毒滴度及生长曲线测定）

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TCID50是用于描述病毒滴度的术语，指的是在培养板孔或试管内引起半数细胞病变或死亡所需的病毒量。这里的病毒量并非指具体的浓度，而是指将原始样品稀释的倍数。例如，如果1毫升的培养液稀释1000倍后，恰好导致50%的细胞感染，那么该病毒的TCID50为1000/mL。

病毒滴度测定

采用终点稀释法来测定病毒滴度，以96孔板为例。

1. 提前一天铺设细胞，每孔接种510个细胞以备感染。

2. 准备病毒稀释液。在10个1.5毫升的无菌EP管中，每管加入900微升的无血清Grace培养基，并在管子上依次标记-1、-2……-9，最后一管作为对照。然后，将待测病毒取100微升加入第一管，混合均匀后依次稀释至第九管。

3. 感染细胞。移除细胞培养基，将稀释后的病毒液加入96孔板的第九排，每孔100微升，设置6或8个重复孔。

4. 换液。两小时后，移除含有病毒的培养液，加入120-150微升含有血清的细胞培养基。

5. 在27℃下培养5-7天。

6. 通过倒置荧光显微镜观察EGFP或mCherry表达情况，计算病毒滴度。

病毒的TCID50可以通过以下公式计算：TCID50/ml=10^(a+x)200/ml，其中a=lg(n)，n为感染率高于50%的最接近稀释度，b和c分别为相应稀释度的感染率，x为(b-50%)/(b-c)。然后利用这个值描述病毒的特性。接下来是绘制病毒生长曲线的步骤：首先铺设细胞于每孔接种新鲜状态良好的细胞；然后准备病毒稀释液以特定的感染复数感染细胞；感染后在特定时间点吸取上清并测定病毒滴度；最后利用Excel绘制病毒生长曲线。以下是使用此方法绘制出的病毒生长曲线结果图。整个实验过程可以帮助我们更深入地理解病毒的复制过程和生长情况，从而为和物研发提供重要参考数据。