为什么融化后的培养基

一、关于GB 4789系列是否应进行阳性对照的问题，当检测50批样品致病菌均为阴性结果时，是否需要人工污染样品做阳性对照来进行质控？

答：GB 4789.1规定要求进行定期的阳性对照，但没有明确规定具体时机。实验室需自行制定标准操作程序（SOP），当实验室经常检测出某种致病菌阳性结果时，可规定定期进行阳性对照，以确保实验室人员持续具备阳性检测能力。最新的RB/T 038-2020食品微生物检测结果质量监控指南建议，对于日常质控，应执行检测方法规定，否则建议每批或每20个样品进行一次阳性对照。质控不一定需要人工污染样品，可以使用标准菌株进行阳性和阴性对照。

二、关于商品化即用培养基的验收问题，购入后实验室是否还需要进行验收？商品化基础培养基中的配套添加剂是否需要验收？如何进行验收？

答：目前的标准要求需要进行验收，而商品化基础培养基中的配套添加剂不需要单独验收。可以通过检查供应方的验收报告和CMA报告来初步评估质量，但实验室仍需要进行自己的验收流程以确保培养基的质量和性能符合实验室的要求。

三、关于培养基性能测试，除了参考GB4789.28外，是否可以参考实验室自己的文件？

答：GB4789.28是一个最低标准，必须达到。如果实验室自己的验收标准高于标准，那么可以参照实验室自己的文件。

四、关于琼脂培养基制备过程现的问题，如平板部分偏软、不凝固等现象的原因是什么？

答：这主要是因为琼脂分布不均导致的。建议在灭菌前将琼脂类培养基加热溶解均匀，如果是大体积配制进行分装灭菌的培养基，建议煮沸溶解并搅拌分装。灭菌后，关注培养基的透光性是否均匀，如果不均匀则轻轻摇晃使其均匀后再倾注平皿使用。

五、关于平板在培养箱中培养后出现的问题，如平板干裂、缩水的原因及如何避免？

答：平板干裂缩水与多种因素有关，包括琼脂的保水性、倾注的培养基量、平皿的透气性、培养箱条件等。针对这些因素，可以通过增加平板培养基厚度、调整培养箱内气流、选择合适透气性的平皿、选择适宜琼脂的培养基等方法来避免此问题。综合考虑并制定相应措施是关键。

六、关于灭菌后的琼脂培养基的再次使用问题，是否可以下次再重新融化继续使用？

答：《GB4789.28 -2013培养基的试剂和质量要求》标准指出，含有活性化学物质或不稳定性成分的固体培养基应即配即用，不可二次融化。对于已添加抗生素、卵黄、血清等不稳定成分的培养基，不可再次融化使用。而对于一般未开封启用的培养基，可以使用沸水浴等方法使其融化，但融化后未用完的培养基不能重新凝固留待下次使用。

七、关于标准菌株存活性如何进行的问题？

答：标准菌株存活性即其复活过程。购买的标准菌株一般为冻干粉或冻干管，需进行复活培养。存活性的验证是定性的判断。复活过程包括打管并按照标准要求进行培养。如果接种到液体培养物中有可见的浑浊或进一步镜检时有目标微生物生长，或接种到固体培养物上有可见的菌落，均视为存活性合格。

八、关于实验室多久做一次沉降菌检测的问题，哪个标准有规定？

答：沉降菌检测包括操作台和房间的，应每两周进行一次。方法可以参照GB/T 16294-2010和GB/T 27405-2008《实验室质量控制规范食品微生物检测》附录中的规定。

九、关于实验室紫外灯的清洁与更换问题

答：紫外线杀菌灯可用纱布沾上75%酒精擦拭表面。紫外灯都有使用寿命，建议记录使用时间，到期必须更换。可根据定期的沉降菌监测情况更换紫外灯。

十、关于灭菌后的琼脂培养基的存放问题，是否可以在恒温箱或恒温水浴锅中过夜或更长时间存放？对培养基性能会有影响吗？

答：《GB4789.28 -2013培养基的试剂和质量要求》标准指出，融化后的培养基应尽快使用，放置时间一般不应超过4小时。长时间的保温可能会造成营养成分流失、灵敏度下降等问题。建议在满足试验安排的情况下，恒温存放的时间越短越好。