配制培养基时为什么要调节ph


动物细胞在特定的细胞培养基中得以存活并成功增殖,这其中对理化性质的严格要求反映了生命的微妙和精准。适宜的pH值是细胞培养基的基石条件之一。大多数动物细胞偏爱轻微的碱性环境,pH值维持在7.2至7.4之间。这一关键的参数并不是随意设定的,而是通过精确校正的pH计来测量和校准。随着细胞在培养过程中的新陈代谢,二氧化碳的释放会导致培养液逐渐酸化,这时酚红作为常用的pH指示剂能够为我们提供直观的反馈。对于某些特定的细胞培养基,尤其是那些不含血清或酚红含量较低的产品,我们只能通过精确的pH测量设备来获取更为准确的pH值。

除了核心的pH值外,细胞培养基的缓冲能力同样至关重要。在封闭式培养过程中,CO2与水的结合产生的碳酸会引起pH的波动。为了确保细胞处于稳定的生长环境,细胞培养基采用了NaHCO3-CO2缓冲系统以及其他如磷酸盐缓冲系统、HEPES缓冲液等,以应对不同情况下pH的变化。其中,NaHCO3因其较小的细胞毒性以及相对较低的成本在细胞培养中得到了广泛的应用。而HEPES作为一种非离子两性缓冲液,在特定的pH范围内发挥着其独特的缓冲作用,但在高浓度下可能对细胞产生毒性影响。在使用时通常会严格控制其浓度。渗透压是影响细胞生存的另一个重要因素。对于大多数哺乳类动物细胞而言,渗透压维持在适当的范围如渗透压在适当的范围内变动是保证细胞正常生存的必要条件。在生产过程中严格控制渗透压对于确保细胞的健康至关重要。温度、粘滞性及表面张力等因素也对细胞培养基产生影响。过高的温度可能导致营养成分的降解和pH等参数的改变。而粘滞性和表面张力则在生物反应器培养时直接影响细胞的生长和损伤程度。在实际操作中需要综合考虑这些因素以确保细胞的健康生长。细胞培养基的配制和使用需要严谨的科学态度和精细的操作技巧以确保细胞的正常生长和繁殖。