常用的核酸染料有哪些
探究核酸电泳技术,不得不提及核酸染料。从事相关实验的人对它应当有所了解。在进行琼脂糖凝胶电泳之前,需要将特定的核酸染料与融化的琼脂糖凝胶混合,待其凝固后即可进行电泳操作,这样的前染步骤有助于节省时间,提高实验效率。
谈及核酸染料中的EB,即溴化乙锭。它是一种分子嵌入剂,曾广泛运用于琼脂糖凝胶电泳中。EB在紫外光下不发光,但能够与单链、双链乃至三链DNA高效结合,并产生明亮的橙色荧光。由于其成本低廉且灵敏度高,一度成为琼脂糖核酸电泳中最为常用的荧光染料。
回忆往昔,我们实验室曾使用过EB染料。虽然现今的实验室新人可能少有接触,但我们必须了解,EB具有一定的毒性。EB与DNA结合后,会导致染料的光漂白及DNA单链断裂,并具有潜在的诱变作用。在进行凝胶电泳时,尽管并非所有操作都直接涉及EB,但无人愿意轻易靠近与EB相关的区域。
由于EB是一种具有诱变性的化合物,其在内诱导突变的机制是不可逆的。长期接触或于含有EB的环境中,可能会对操作人员的健康产生潜在的危害,特别是在遗传方面。这使我们更加意识到安全操作的重要性。曾经听说有长期从事生化实验的女教师所生的孩子出现畸形的情况,虽然真假难辨,但我们仍需保持高度警惕。
值得庆幸的是,随着科技的发展和研究的深入,现在已有多种EB的替代品问世,如sybrgreen、goldview等。虽然部分替代品在某些方面尚不稳定或毒性尚不明确,但这也提醒我们在进行实验时必须格外小心。