酶标仪测细胞凋亡率到底怎么个原理？

酶标仪测定细胞凋亡率通常基于细胞膜通透性改变和/或特定酶活性的原理。最常用的方法是使用Annexin V-FITC/PI双染法。Annexin V是一种能与细胞膜上磷脂酰丝氨酸（PS）结合的蛋白质，PS在健康细胞中位于膜内侧，细胞凋亡早期会“翻转”到膜外侧。FITC标记的Annexin V可以结合这些暴露的PS，呈现绿色荧光。同时，随着细胞膜完整性的丧失，碘化丙啶（PI）等核酸染料可以进入细胞内部，使细胞核呈现红色荧光。健康细胞和早期凋亡细胞（仅Annexin V阳性）呈现绿色荧光，而晚期凋亡细胞和坏死细胞则呈现绿色和红色双重荧光。通过酶标仪分别检测绿色和红色荧光，并计算两者比例，可以定量分析细胞凋亡率。此外，一些方法也利用细胞色素C从线粒体释放到细胞质中，或使用Caspase活性的检测来评估凋亡进程。酶标仪通过测量荧光强度，将数据转化为凋亡细胞的百分比，为研究细胞凋亡提供定量依据。